Safranin O – všestranné farbivo pre biologickú a chemickú analýzu
Safranin O je katiónové farbivo, ktoré zohráva ústrednú úlohu v biologickej a chemickej analýze. Toto červené farbivo sa používa v mnohých aplikáciách, od farbenia tkanivových rezov v mikroskopii až po identifikáciu určitých organických zlúčenín. V tomto blogovom príspevku sa chceme podrobnejšie zaoberať Safraninom O a jeho rôznorodými možnosťami použitia.
Chémia Safraninu O
Safranin O, známy aj ako Safranin T alebo Safranin 3B, je organická zlúčenina s chemickým vzorcom C₂₀H₁₉ClN₄. Ide o katiónové farbivo patriace do skupiny azínových farbív. Safranin O má červenú farbu a je dobre rozpustný vo vode.
Štruktúra Safraninu O pozostáva z aromatického kruhového systému s kladne nabitou dusíkovou skupinou. Táto katiónová vlastnosť je kľúčová pre mnohé aplikácie farbiva, pretože mu umožňuje elektrostaticky sa viazať na záporne nabité štruktúry.
Mikroskopické farbenia so Safraninom O
Jednou z hlavných aplikácií Safraninu O je farbenie tkanivových rezov vo svetelnej mikroskopii. Safranin O sa selektívne viaže na určité štruktúry v bunkách a tkanivách, čo umožňuje kontrastné zobrazenie.
V botanike sa Safranin O často používa na zviditeľnenie bunkových stien a zdrevnatenia v rastlinných bunkách. Farbivo sa viaže na lignín a celulózu a tieto štruktúry farbí na červeno. Tak je možné napríklad ľahko identifikovať drevené bunky v priečnych rezoch rastlinných tkanív.
Aj v histológii a cytológii zohráva Safranin O dôležitú úlohu. Tu sa farbivo často používa v kombinácii s inými farbivami ako svetlozelená alebo methylénová modrá na dosiahnutie diferenciálneho farbenia. Tak je možné napríklad cielene zafarbiť bunkové jadrá, cytoplazmu a mimobunkové štruktúry v tkanivových rezoch.
Analytické aplikácie Safraninu O
Okrem mikroskopického farbenia nachádza Safranin O rôznorodé aplikácie aj v chemickej analýze. Vďaka svojim katiónovým vlastnostiam môže farbivo viazať na rôzne aniónové štruktúry a tak sa použiť na detekciu určitých látok.
Príkladom je detekcia sulfátov. Safranin O vytvára s sulfátovými iónmi nerozpustný červený komplex, ktorý môže byť kvantifikovaný fotometricky. Tento postup sa často používa v analýze vody na stanovenie obsahu sulfátov vo vodách.
Detekcia fosfátov je tiež možná so Safraninom O. Tu farbivo vytvára červený komplex s fosformolybdénovou kyselinou, ktorý môže byť tiež detekovaný fotometricky. Táto metóda nachádza uplatnenie v pôdnej a environmentálnej analýze.
Okrem toho možno Safranin O použiť na detekciu proteínov. Farbivo sa viaže na katiónové zvyšky aminokyselín a farbí proteíny na červeno. Táto vlastnosť sa využíva napríklad v elektroforéze na zviditeľnenie proteínových pásov v géloch.
Ďalšie aplikácie Safraninu O
Okrem opísaných aplikácií v mikroskopii a analýze nachádza Safranin O využitie aj v iných oblastiach:
Farbenie baktérií
Safranin O sa často používa v bakteriológii na farbenie grampozitívnych baktérií. Spolu s kryštálovou violetou tvorí súčasť Gramovho farbiaceho postupu, ktorý slúži na rozlíšenie grampozitívnych a gramnegatívnych baktérií.
Farbenie textílií
Ako azínové farbivo môže byť Safranin O použitý aj na farbenie textílií. Farbivo sa dobre viaže na prírodné vlákna ako vlna a hodváb a vytvára sýtu červenú farbu.
Lekárske aplikácie
V medicíne sa Safranin O používa ako farbivo na diagnostické účely, napríklad v urológii na zobrazenie zápalov močových ciest.
Záver
Safranin O je všestranné farbivo, ktoré zohráva kľúčovú úlohu v biologickej a chemickej analýze. Od farbenia tkanivových rezov v mikroskopii až po detekciu iónov v analýze vody – Safranin O je neodmysliteľnou súčasťou každodenného laboratórneho a výskumného života. Jeho vlastnosti ako katiónového farbiva z neho robia cenný nástroj v modernej analýze.
 

 
                    
 
                    
 
                    
 
                    
 
                    
 
                    
 
                    
 
                    

 
                     
                                